Dernière modification le 20/02/2022
Difficulté
Facile
Durée
1 heure(s)
Coût
30 EUR (€)
Description
Découvrez à quel point il est facile de cloner les champignons ! L’inoculation consiste à commencer une culture de champignons sur le substrat de votre choix. Facile et rapide à mettre en place, elle est adaptée pour toute culture liquide de champignons.
Sommaire
Sommaire
- 1 Description
- 2 Sommaire
- 3 Introduction
- 4 Étape 1 - Préparation
- 5 Étape 2 - Optionel, copie de culture liquide : fabrication du bocal pour inoculation
- 6 Étape 3 - Optionel, copie de culture liquide : donner à manger au mycélium liquide
- 7 Étape 4 - Inoculation de grains : le rinçage, jour 1
- 8 Étape 5 - Inoculation de grains : la stérélisation, jour 2
- 9 Étape 6 - Inoculation de grains : inoculation liquide, jour 3
- 10 Étape 7 - Inoculation de grains : cloner ou fructifier
- 11 Étape 8 - Inoculation de grains : réaliser un transfert lorsque l'incubation est terminée
- 12 Étape 9 - Inoculation de grains : fructification, le lendemain de la fin de l'incubation
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Introduction
Dans ce tutoriel, nous allons apprendre comment utiliser une seringue d'inoculation liquide. L'un des pré-requis est donc de disposer d'une seringue d'inoculation liquide.
Plusieurs phases : incubation et fructification. Pendant la phase de fructification, on va chercher à exciter le mycélium : lumière, humidité, circulation de l'air
lutte micro-biologique : on prépare un substrat propre, de façon à favoriser notre champignon.
L'inoculation liquide ?
Dans la myciculture, l'inoculation liquide consiste dans le début d'une culture de champignon à l'aide d'une culture liquide. La culture liquide est de l'eau avec du mycélium.
Pourquoi est-ce intéressant ?
Il existe plusieurs façon de commencer une culture de champignons. L'inoculation liquide est l'une des plus faciles.
Réception de la seringue d'inoculation liquide
Dès la réception de la seringue de mycélium, placez la seringue au réfrigérateur, elle doit être utilisé dans les deux semaines suivantes !
Deux possibilités s'offrent à vous :
- Copie de culture liquide
- Inoculation de grains.
Dans les deux cas, la préparation est la même :
Un ordre chronologique est à respecter.
Inoculation de grains
L'inoculation de grains consiste à déposer une culture liquide sur un substrat.
L'inoculation de grains peut se réaliser dans un bocal ou dans un sac.
Copie de culture liquide
Glossaire :
Mycélium : partie cachée du champignon
Inoculation : fécondation
Culture liquide : mélange d'eau avec du mycélium
Substrat : Aliment du champignon, le mycélium se fixe sur le subtrat
Matériaux
Kit déjà prêt :
– Paires de gants sans talc et masques.
– Charlotte ou bonnet propre (ceux de piscine sont tops !).
– Bougies chauffe-plat (Minimum 10 à 20)
- Sacs de culture
– Alcool 70°
– Essuie-tout
– Compresses stériles
Outils
– Thermomètre
– Verre doseur
– Paire de ciseaux
– Pinces à linge (en bois recommandé)
– Grande casserole/autocuiseur ou four.
– Vaporisateur
Étape 1 - Préparation
Nous vous conseillons de vous placer dans votre cuisine, sous votre hotte. Elle empêchera les poussières de se déposer dans vos sacs de culture.
Nettoyez votre plan de travail et chaque zone de contact potentiel avec de l’alcool à 70° avant chaque manipulation.
Lavez vous soigneusement les mains et les bras au savon avant chaque manipulation.
Attachez vous les cheveux et/ou mettez votre bonnet.
Nous vous conseillons vivement de manipuler votre mycélium liquide hors de la lumière du soleil, sous une lumière douce et faible (veilleuse de nuit par exemple).
Étape 2 - Optionel, copie de culture liquide : fabrication du bocal pour inoculation
Dans cette étape, nous allons réaliser un bocal pour la culture liquide. Le bocal va contenir deux orifices. L'un des orifices est utilisé pour l'insertion de la seringue, le deuxième sert pour la respiration du bocal.
- Prenez un bocal et réalisez deux orifices à l'aide d'une perceuse à colonne.
- Disposez sur l'un des orifices un ..., disposez sur le deuxième orifice ...
Votre bocal est prêt pour l'inoculation liquide !
Étape 3 - Optionel, copie de culture liquide : donner à manger au mycélium liquide
- Suivez l'étape 1 de ce tutoriel
- prenez votre bocal pour inoculation et additionner de l'eau avec du sucre
- Dans votre cuisine, nettoyez votre plan de travail à l’alcool.
- Allumez votre hotte et placez des bougies chauffe-plat tout autour de votre zone de travail.
- Allumez les bougies et sortez votre seringue de mycélium liquide du réfrigérateur, pour la placer au centre de la zone de travail.
- Enlevez le bouchon de votre seringue et insérez l’aiguille.
- Prenez votre bocal pour inoculation, nettoyez l’extérieur de ce bocal à l’alcool et placez le dans votre zone de travail.
- Prenez deux compresses stériles et imbibez les d’alcool.
- Placez l’aiguille de votre seringue sur la flamme d’une des bougies et attendez que la pointe devienne rouge.
- Placez la ensuite entre les deux compresses imbibées d’alcool.
- Videz entièrement le mycélium de votre seringue dans votre bocal.
- Filmer votre bocal avec du tissu ou du papier
- Patientez le temps d’incubation indiqué. Notez le dans votre agenda !
(vous pourrez regarder si votre mycélium colonise correctement vos liquide au bout de quelques jours mais attention à la lumière !).
Le mycélium va se propager.
ça serait cool de donner des éléments lorsque la culture est bonne et lorsqu'elle n'est pas bonne.
Lorsque le mycélium s'est bien propager,nous vous invitons à réaliser une inoculation des grains. Les étapes sont décrites ci-dessus
Étape 4 - Inoculation de grains : le rinçage, jour 1
Si vous souhaitez inoculer des grains, il faudra stériliser les grains le premier jour.
- Sortez vos grains et rincez les abondamment à l’eau froide, jusqu’à obtention d’une eau claire .
- Placez ces grains dans un des deux sacs vides, fournis dans votre kit.
- Prenez du carbonate de calcium (CaCO3) et ajoutez 2 à 5% du poids de vos grains.
- Remplissez ce sac d’eau chaude du robinet, légèrement au dessus du niveau des grains.
- Fermez le sac à l’aide de pinces à linge et laissez le reposer une nuit.
Étape 5 - Inoculation de grains : la stérélisation, jour 2
- Faites bouillir de l’eau dans votre casserole.
- Sortez votre sac de grains et remplissez le jusqu'au niveau des grains.
- Remplissez votre vaporisateur avec le restant de cette eau refroidie.
- Remplissez à nouveau votre casserole d’eau et faites bouillir.
- Fermez le sac de grain en l’enroulant sur lui même (de bas en haut) et immergez le dans votre casserole/autocuiseur.
- Laissez le bouillir 3h dans votre casserole à couvert.
- Sortez votre sac de la casserole et laissez le refroidir une nuit.
Étape 6 - Inoculation de grains : inoculation liquide, jour 3
L'inoculation liquide se réalise sur le substrat propre. Soit le substrat est dans un bocal (comme sur les images), soit le substrat est contenu dans un sac de culture. Dans les deux cas, le mycélium doit pouvoir respirer.
- Dans votre cuisine, nettoyez votre plan de travail à l’alcool.
- Allumez votre hotte et placez des bougies chauffe-plat tout autour de votre zone de travail.
- Allumez les bougies et sortez votre seringue de mycélium liquide du réfrigérateur, pour la placer au centre de la zone de travail.
- Enlevez le bouchon de votre seringue et insérez l’aiguille.
- Prenez votre sac de grains stérilisés, nettoyez l’extérieur de ce sac à l’alcool et placez le dans votre zone de travail.
(Attention à ce que le filtre ne touche pas d’alcool)
- Prenez deux compresses stériles et imbibez les d’alcool.
- Placez l’aiguille de votre seringue sur la flamme d’une des bougies et attendez que la pointe devienne rouge.
- Placez la ensuite entre les deux compresses imbibées d’alcool.
- Ouvrez votre sac dans la zone de travail et videz entièrement le mycélium de votre seringue sur votre grain.
- Fermez le sac immédiatement en pliant le dessus et fixez vos pinces à linge.
- Chassez l’air et placez le dans une boite non transparente à la température d’incubation indiquée.
- Patientez le temps d’incubation indiqué. Notez le dans votre agenda !
(vous pourrez regarder si votre grain colonise correctement vos grains au bout de quelques jours mais attention à la lumière !).
Le mycélium va se propager.
ça serait cool de donner des éléments lorsque la culture est bonne et lorsqu'elle n'est pas bonne.
Étape 7 - Inoculation de grains : cloner ou fructifier
Après avoir attendu la période d'incubation du champignon (cette période dépend du type de champignon et du volume de votre contenant).
Voici les périodes d'incubation de quelques variétés :
Pleurote : 14 jours
Shiitakés : 14 jours
Dès que le substrat est colonisé, vous avez les deux possibilités suivantes :
- faire des trous dans le sac de façon à passer à l'étape de fructification et récolter les champignons
- Copier une nouvelle fois les champignons
Il est conseillé de ne copier le champignon qu'au maximum trois fois.
Si vous choisissez de faire fructifier vos champignons. Il faudra placer le champignon dans les conditions adéquates :
- un sac plastique avec des orifices
Étape 8 - Inoculation de grains : réaliser un transfert lorsque l'incubation est terminée
Cette étape présente une solution pour transférer un substrat colonisé dans un sac. Transférer une culture dans un sac permet de donner à manger au mycélium, il va donc grandir en volume. On réalise également le transfert pour obtenir du mycélium dans un sac plastique. On pourra réaliser des orifices dans le sac plastique, de façon à pouvoir passer en phase de fructification.
- Faites chauffer de l’eau dans votre casserole à feu doux.
(Pour les pleurotes : vous pouvez ajouter 500g/max de marc de café (de maximum trois jours) à cette eau !). Le marc
- Prenez un sac et remplissez le avec le substrat adapté à la variété de champignons de votre choix
- Munissez vous de votre thermomètre et attendez que l’eau chaude atteigne 70°C/120°C (Pasteurisation/stérilisation en fonction de la variété).
- Remplissez votre sac de substrat avec cette eau et refaites chauffer de l’eau à feu doux.
- Préchauffez votre four à 70°/120°C si vous constatez que les sacs de substrat sont trop volumineux pour votre casserole !
- Prenez votre thermomètre, et mesurez la température de l’eau., elle ne doit jamais dépasser les 93°C !
- Pour savoir si votre substrat est bien humidifié, prenez-en une bonne poignée dans la main et pressez-le.
- Il doit se détacher tout seul et ne pas rester en boule.
- Pour une meilleure compréhension, regardez notre vidéo tuto « Bien mouiller son substrat ! »
- Fermez votre sac à l’aide de pinces à linge (en bois recommandé).
- Plongez les sacs dans l’eau et laissez-les pendant 2 heures, à couvert.
- Prenez la température chaque demi-heure
- Placez vos sacs dans votre four à 70°C/120°C pendant deux heures !
- Laissez-les refroidir une nuit et conservez-les fermés.
Étape 9 - Inoculation de grains : fructification, le lendemain de la fin de l'incubation
Dans votre cuisine, nettoyez votre plan de travail à l’alcool.
- Allumez votre hotte et placez des bougies chauffe-plat tout autour de votre zone de travail.
- Sortez votre sac de grains inoculés de sa boite, le mycélium doit avoir coloniser l’ensemble des grains !
- Nettoyez l’extérieur du sac de grains inoculés et le sac de substrat refroidi avec de l’alcool.
Attention à ne pas toucher le filtre des sacs avec cet alcool.
- Ouvrez vos sacs de substrat et le sac de grains inoculés au centre de la zone de travail.
- Cassez le grain dans le sac pour en faire des grumeaux,
- Remplissez votre sac de substrat avec vos grains inoculés. Fermez-les immédiatement avec les pinces à linge en chassant l’air des sacs.
- Replacez les sacs dans leur carton et placez les dans une pièce à une température comprise entre 20 et 23°C pendant trois semaines.
- Prêt d’un radiateur dans votre salle de bain est une solution astucieuse !
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