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*Désinfectez le scalpel et passez sa lame dans la flamme afin de la stériliser (voir photo 4). Laissez refroidir quelques secondes | *Désinfectez le scalpel et passez sa lame dans la flamme afin de la stériliser (voir photo 4). Laissez refroidir quelques secondes | ||
*A l’aide de la lame du scalpel, coupez un carré de 5 mm de côté dans le cœur du champignon sous le chapeau, au niveau du pied (voir photo 4) | *A l’aide de la lame du scalpel, coupez un carré de 5 mm de côté dans le cœur du champignon sous le chapeau, au niveau du pied (voir photo 4) | ||
− | {{Warning|La lame du scalpel ne doit pas toucher l’enveloppe externe du | + | {{Warning|La lame du scalpel ne doit pas toucher l’enveloppe externe du champignon, celle-ci n’est pas stérile}} |
*Gardez le morceau de champignon sur le scalpel, ouvrez le couvercle d'une des boîtes de Petri, et placez le morceau de champignon au centre de la gélose (voir photo 5) | *Gardez le morceau de champignon sur le scalpel, ouvrez le couvercle d'une des boîtes de Petri, et placez le morceau de champignon au centre de la gélose (voir photo 5) | ||
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'''Incubation des cultures liquides''' | '''Incubation des cultures liquides''' | ||
− | *Placez les bocaux dans un endroit sombre à 24°C : ces conditions sont idéales pour la propagation de la culture liquide | + | *Placez les bocaux dans un endroit sombre à 24°C : ces conditions sont idéales pour la propagation de la culture liquide (voir photo) |
*Tous les 2 à 3 jours, faites en sorte d'homogénéiser la culture liquide en secouant les bocaux. Par cette action, la pièce de monnaie ou l'agitateur aimanté va fragmenter le mycélium. En effet, le mycélium a tendance a créer une seule masse ce qui n'est pas pratique lorsqu'on devra extraire le liquide | *Tous les 2 à 3 jours, faites en sorte d'homogénéiser la culture liquide en secouant les bocaux. Par cette action, la pièce de monnaie ou l'agitateur aimanté va fragmenter le mycélium. En effet, le mycélium a tendance a créer une seule masse ce qui n'est pas pratique lorsqu'on devra extraire le liquide | ||
*Au bout de 7 à 14 jours (selon l'espèce de champignons cloné), la culture liquide devrait être prête à être utilisée. Si vous ne souhaitez pas l'utiliser tout de suite, vous pouvez la stocker quelques semaines au frigo. | *Au bout de 7 à 14 jours (selon l'espèce de champignons cloné), la culture liquide devrait être prête à être utilisée. Si vous ne souhaitez pas l'utiliser tout de suite, vous pouvez la stocker quelques semaines au frigo. | ||
*'''Comment savoir si la culture liquide est contaminée ?''' Vous pouvez réaliser un test visuel de turbidymétrie, c'est-à-dire observer le trouble de la solution. Il s'agit d'observer la solution au repos, et non pas après avoir homogénéisé : | *'''Comment savoir si la culture liquide est contaminée ?''' Vous pouvez réaliser un test visuel de turbidymétrie, c'est-à-dire observer le trouble de la solution. Il s'agit d'observer la solution au repos, et non pas après avoir homogénéisé : | ||
− | **Si le liquide est trouble, c'est que la culture est probablement contaminée : il ne vaut mieux pas l'utiliser pour ensemencer les grains | + | **Si le liquide est trouble, c'est que la culture est probablement contaminée (voir photo) : il ne vaut mieux pas l'utiliser pour ensemencer les grains |
− | **Si le liquide est clair, c'est que la culture est en bonne santé | + | **Si le liquide est clair, c'est que la culture est en bonne santé (voir photo) |
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{{Tuto Step | {{Tuto Step | ||
|Step_Title=<translate>Préparation des grains</translate> | |Step_Title=<translate>Préparation des grains</translate> | ||
− | |Step_Content=<translate>Lorsque le mycélium s'est bien développé dans les boîtes de Petri (voir photo 1), vous pouvez préparer les grains avant inoculation. Pour rappel, ce tutoriel est prévu pour réaliser | + | |Step_Content=<translate>Lorsque le mycélium s'est bien développé dans les boîtes de Petri (voir photo 1) ou dans les cultures liquides (voir photo), vous pouvez préparer les grains avant inoculation. Pour rappel, ce tutoriel est prévu pour réaliser 1 sac de 1,7 kg de mycélium en grains dans le but de confectionner 8 tours de culture pouvant fournir jusqu'à 500 g de champignons. |
+ | |||
+ | <br />{{Idea|À chaque session, nous réalisions 2 sacs pour assurer les éventuelles pertes ou contamination. Je vous conseille de 2 fois plus de sacs que la quantité nécessaire pour anticiper ces problèmes. De manière générale, adaptez les indications selon le nombre de sac que vous souhaitez réaliser.}} | ||
Line 245: | Line 247: | ||
*Versez 1,4 kg de grains de seigle | *Versez 1,4 kg de grains de seigle | ||
− | *Versez | + | *Versez 5 g de chaux éteinte |
*Versez 800 mL d'eau | *Versez 800 mL d'eau | ||
− | *Mélangez le tout en | + | *Mélangez le tout en secouant le sac délicatement |
*Fermer le sac avec une pince dédiée (voir photo 2) ou des pinces à ligne en bois | *Fermer le sac avec une pince dédiée (voir photo 2) ou des pinces à ligne en bois | ||
− | *Laissez reposer pendant 10 à 12h maximum</translate> | + | *Réitérez l'opération selon le nombre de sac à réaliser. De notre côté nous réalisons 2 sacs par session pour assurer les éventuelles contaminations. |
+ | *Laissez reposer pendant 10 à 12h maximum | ||
+ | |||
+ | '''Stérilisation des grains''' | ||
+ | |||
+ | * Vous pouvez réaliser les mêmes étapes que celles décrites à l'étape 5 pour stériliser les sacs de grains, soit avec l'autoclave soit avec la cocotte minute</translate> | ||
|Step_Picture_00=Biosph_re_Urbaine_-_Fili_re_clonage_de_champignons_WhatsApp_Image_2024-11-13_at_16.47.48.jpeg | |Step_Picture_00=Biosph_re_Urbaine_-_Fili_re_clonage_de_champignons_WhatsApp_Image_2024-11-13_at_16.47.48.jpeg | ||
|Step_Picture_01=Biosph_re_Urbaine_-_Cl_nage_de_champignons_Capture_d_e_cran_2024-10-23_a_10.24.01.png | |Step_Picture_01=Biosph_re_Urbaine_-_Cl_nage_de_champignons_Capture_d_e_cran_2024-10-23_a_10.24.01.png | ||
}} | }} | ||
{{Tuto Step | {{Tuto Step | ||
− | |Step_Title=<translate>Inoculation des grains | + | |Step_Title=<translate>Inoculation des grains</translate> |
− | |Step_Content=<translate>*Nettoyez les surfaces de travail avec | + | |Step_Content=<translate>'''Ces étapes nécessitent un environnement stérile, c'est pourquoi nous les réalisons dans le ChampiLab.''' |
− | *Découpez la gélose en plusieurs morceaux puis versez le tout dans le sac de grains | + | |
− | *À travers le sac, décomposez la gélose et mélangez le tout pour la répartir | + | <br /> |
− | *Scellez le haut du sac en utilisant une thermoscelleuse. Vérifiez que le sac est bien scellé en appliquant une pression dessus : si vous entendez de l'air qui s'échappe, réitérez l'opération un peu plus bas (voir photo)</translate> | + | |
+ | *Lorsque vous rentrez dans le ChampiLab, mettez une blouse de laboratoire, une charlotte sur la tête, un masque, des gants hygiéniques, des surchaussures | ||
+ | *Nettoyez les surfaces de travail et le filtre du flux laminaire avec un tissu propre imbibé d'alcool à 90°C | ||
+ | |||
+ | '''Inoculation des grains avec gélose des boîtes de Petri. Cette étape vous concerne si vous n'avez pas réalisé la culture liquide (étape 7)''' | ||
+ | |||
+ | *Allumez la lampe à alcool et désinfectez le scalpel à l'alcool puis en passant sa lame dans la flamme afin de la stériliser | ||
+ | *Découpez la gélose en plusieurs morceaux puis versez le tout dans le sac de grains (voir photo) | ||
+ | *À travers le sac, décomposez la gélose et mélangez le tout pour la répartir uniformément dans les grains | ||
+ | *Scellez le haut du sac en utilisant une thermoscelleuse (voir photo) | ||
+ | *Vérifiez que le sac est bien scellé en appliquant une pression dessus : si vous entendez de l'air qui s'échappe, réitérez l'opération un peu plus bas (voir photo) | ||
+ | *Placez les sacs en incubation dans un environnement sombre à 25°C pendant quelques semaines | ||
+ | *Le sac est prêt lorsque le mycélium a colonisé une majorité du sac : vous pourrez observer de nombreuses zones blanches à l'intérieur du sac (voir photo) | ||
+ | |||
+ | |||
+ | '''Inoculation des grains avec culture liquide'''. '''Cette étape vous concerne si vous avez réalisé la culture liquide (étape 7)''' | ||
+ | |||
+ | * Plantez la seringue stérile de 10 mL avec aiguilles rose de 18G dans le bouchon d'un bocal | ||
+ | * Penchez votre bocal à l'horizontale puis prélevez 10 mL de la culture liquide avec la seringue | ||
+ | * Versez l'intégralité de la seringue dans un sac de grains de seigle stérilisé | ||
+ | * À travers le sac mélangez le tout pour répartir le liquide uniformément dans les grains | ||
+ | *Scellez le haut du sac en utilisant une thermoscelleuse (voir photo) | ||
+ | *Vérifiez que le sac est bien scellé en appliquant une pression dessus : si vous entendez de l'air qui s'échappe, réitérez l'opération un peu plus bas (voir photo) | ||
+ | *Placez les sacs en incubation dans un environnement sombre à 25°C pendant quelques semaines | ||
+ | *Le sac est prêt lorsque le mycélium a colonisé une majorité du sac : vous pourrez observer de nombreuses zones blanches à l'intérieur du sac (voir photo)</translate> | ||
|Step_Picture_00=Biosph_re_Urbaine_-_Cl_nage_de_champignons_Capture_d_e_cran_2024-10-23_a_12.33.56.png | |Step_Picture_00=Biosph_re_Urbaine_-_Cl_nage_de_champignons_Capture_d_e_cran_2024-10-23_a_12.33.56.png | ||
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}} | }} | ||
{{Notes | {{Notes |
Tutorial de BIOSPHERE EXPERIENCE | Categories : Housing, Food
Ce tutoriel a été créé dans le cadre de l'expérience de mode de vie low-tech en ville menée par Biosphère Expérience à Boulogne Billancourt. Il présente les étapes de confection de mycélium en grains par la filière dédiée à la culture de champignons.
Ce tutoriel a été créé dans le cadre de l'expérience de mode de vie low-tech en ville menée par Biosphère Expérience à Boulogne Billancourt. Il présente les étapes de confection de mycélium en grains par la filière dédiée à la culture de champignons.
Le projet - Biosphère Urbaine
Pendant 4 mois, Corentin et Caroline ont expérimenté un mode de vie low-tech en ville en collaboration avec un réseau d'acteurs locaux. L'idée est de profiter de la forte densité de population pour répartir les connaissances, diviser le travail et mutualiser le matériel. Ainsi, Emma a constitué et coordonné des filières temporaires composées de structures locales mais aussi de citoyens. Au total, ce sont 14 personnes du territoire de Boulogne Billancourt qui ont participé à cette expérience !
Filière - culture de pleurotes
Les champignons sont délicieux et nutritifs, mais leur coût élevé sur le marché pose souvent un défi financier. Pour résoudre ce problème, Emma a créé une filière temporaire de culture de pleurotes qui assure tout le cycle de reproduction. À partir de pellets de paille et de mycélium en grains confectionnés au ChampiLab, Viriginie, Laurine, Corentin et Caroline ont reconstitué tout le cycle de culture du pleurote. L’idée est de mutualiser un espace pour créer des ateliers de confection des tours de culture mais aussi pour stocker le matériel et les tours pendant la phase d'incubation. Ce tutoriel vise à démocratiser la culture de pleurotes à l'échelle d'un territoire.
Déroulé de l'organisation durant l'expérience :
Ceci est une liste de matériaux exhaustive. Si vous avez déjà certains éléments, nous vous conseillons de favoriser la seconde main et d’adapter les dimensions et tailles tout au long du tuto.
Culture en gélose (10 géloses)
Culture liquide (2 bocaux)
Inoculation des grains (2 sacs)
Ceci est une liste d'outils exhaustive à adapter en fonction de ce que vous possédez déjà.
Si vous souhaitez monter une filière de ce type, il vous faudra trouver un espace partagé sur le territoire et des voisins motivés pour participer à la filière. Bien évidement, je vous invite à adapter cette filière selon vos besoins et l'organisation qui vous va le mieux.
Comment trouver un espace partagé ?
Il me fallait trouver un endroit avec plusieurs espaces : un laboratoire, un local de stockage et un espace atelier. En prospectant sur le territoire, j'ai cherché des lieux déjà existants comme un biolab (laboratoire collaboratif pour explorer le vivant) ou des espaces de la ville. Dans notre cas, il n'existe pas de Biolab à Boulogne Billancourt ce qui m'a amené à discuter avec la ville pour trouver le bon espace : la Maison de la Planète.
Comment trouver des personnes pour monter une filière ?
De mon côté, j'ai largement diffusé l'information via les réseaux de la ville (site internet, article dans le journal de la ville), nos réseaux sociaux ou encore les associations du territoire en les contactant par mail et par téléphone. Quelques exemples d'associations : Shifters, Ville en transition, Low-tech Lab..
Plus généralement, j'ai parlé du projet à toutes les personnes que je rencontrai au quotidien. Si vous souhaitez en parler à votre entourage, à vos amis, à vos collègues, je vous invite à utiliser toute la documentation présente sur ce tutoriel pour vous sentir capable de présenter les objectifs et intérêts de monter une telle filière à l'échelle du territoire.
Par ailleurs, 250 citoyens en France et à l'étranger ont expérimenté la culture de pleurotes dans le cadre du programme de sciences participatives. N'hésitez pas à rejoindre les groupes WhatsApp mis en place durant l'expérience! Vous trouverez peut être des personnes, proche de chez vous, intéressées pour monter cette filière.
Suivant le montage que vous choisissez et votre utilisation du réemploi, nous estimons entre 10 et 20 euros le coût pour réaliser un sac de mycélium en grains. Cela dépend de...
Avant de faire vos achats, nous vous conseillons fortement de lire en entier le tutoriel. Nous vous encourageons à réaliser des achats groupés pour éviter le gaspillage et partager les éventuels frais de livraison.
Les étapes suivantes montrent comment réaliser plusieurs boîtes de Petri nécessaires pour inoculer les grains de seigle.
Cette recette permet de réaliser 10 boîtes de Petri. Je vous invite à juster les quantités selon le nombre de boîte de Pétri désiré.
Stérilisation à la cocotte minute avec manomètre
Stérilisation à l'autoclave
Le clonage est une étape délicate car elle nécessite un espace propre et stérile pour éviter les contaminations. Dans le cadre du projet, nous avons monté un ChampiLab, un atelier partagé où l'on retrouve tout le matériel nécessaire pour réaliser du clonage. Notamment, nous avons fabriqué un flux laminaire avec l'entreprise Breizh Bell, spécialiste de la culture de champignons dans une démarche low-tech (voir tutoriel Biosphère Urbaine - Flux laminaire).
Le clonage peut se réaliser avec toute variété de champignons, idéalement pas trop vieux : un jeune champignon aura une croissance plus rapide. Dans le cadre du projet nous avons généralement cloner des pleurotes.
Cette étape est fortement conseillée car elle permet d'avoir le meilleur environnement pour que le mycélium se développe bien. Si vous ne souhaitez pas passer par cette étape, rendez-vous à l'étape suivante pour la préparation des grains.
Préparation des bocaux
Préparation de la culture
Si vous avez un agitateur magnétique (voir photo 2), placez un barreau agitateur aimanté à l'intérieur de chaque bocal, fermez-les puis secouez-les doucement pour uniformiser le mélange. Si vous n'avez pas d'agitateur magnétique, placez une pièce de monnaie propre et désinfectée à l'alcool 90° à l'intérieur de chaque bocal, fermez-les puis secouez-les doucement pour uniformiser le mélange
Stérilisation des bocaux
Ensemencement des cultures liquides à partir des boîtes de Petri (dans le ChampiLab)
Incubation des cultures liquides
Lorsque le mycélium s'est bien développé dans les boîtes de Petri (voir photo 1) ou dans les cultures liquides (voir photo), vous pouvez préparer les grains avant inoculation. Pour rappel, ce tutoriel est prévu pour réaliser 1 sac de 1,7 kg de mycélium en grains dans le but de confectionner 8 tours de culture pouvant fournir jusqu'à 500 g de champignons.
Pour chacun de sacs de culture :
Stérilisation des grains
Ces étapes nécessitent un environnement stérile, c'est pourquoi nous les réalisons dans le ChampiLab.
Inoculation des grains avec gélose des boîtes de Petri. Cette étape vous concerne si vous n'avez pas réalisé la culture liquide (étape 7)
Inoculation des grains avec culture liquide. Cette étape vous concerne si vous avez réalisé la culture liquide (étape 7)
Document rédigé par Emma Bousquet-Pasturel dans le cadre de programme de sciences participative de Biosphère Expérience.
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